“体外受精-胚胎移植”(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)是指精子和卵母细胞在体外自然结合并继续培养到卵裂期胚胎或囊胚,再移植回母亲子宫内发育着床的过程。另外与自然受精相比,体外受精受到很多因素的限制。那么,在体外,婴儿不是在试管里培养的,是在哪里培养的呢?
近年来,胚胎培养的培养体系有了较大的改变,培养液的配伍模拟了人类输卵管的成分及其浓度,从而更好地满足人类胚胎的需求。
胚胎体外培养的培养液都有哪些成分?
培养液的水
水占培养液总体成分的99%。培养液对配制的水要求非常高。水的质量和纯度直接影响培养液的质量,从而影响胚胎的发育。
能量物质
不同的哺乳动物需要最适的培养液不同,人类胚胎培养液的能量底物主要根据输卵管和宫腔内能量底物的变化而设计。人的早期胚胎在致密化之前主要以丙酮酸、乳酸和氨基酸为能量底物。胚胎致密化之后,葡萄糖的糖酵解成为重要的产生通路。
无机离子
目前应用于培养的各种培养液的离子组成几乎都是基于KRB液的配伍,含有钠离子、氯离子、钙离子、镁离子、硫酸根离子,其中钠离子和氯离子浓度最高。
氨基酸
培养液中添加氨基酸能够克服早期胚胎的发育阻滞,促进胚胎发育,增强种植后的发育能力,其作用的可能机制主要是调节胚胎的能量代谢,抑制糖分解活性,从而降低糖对早期胚胎发育的有害影响。
生长因子
体外培养液中添加胰岛素样生长因子能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,有利于胚胎发育。而且可以促进卵泡发育,增加蛋白质的合成和囊胚的孵化。
抗氧化剂
胚胎主要有两类氧化机制,即细胞外抗氧化机制和细胞内抗氧化机制。细胞外氧化机制主要由卵泡或生殖道内的次牛黄酸、牛磺酸、维生素等物质操纵。细胞内抗氧化机制主要由一些酶来操纵,如过氧化物酶歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等,维持胚胎的正常发育。
蛋白质
培养液中常用的蛋白质主要是血清。主要是维持细胞的存活,促进生长、维持细胞pH和渗透压、增加细胞弹性及膜的完整性。目前人类培养液中最多添加的蛋白是人类血清白蛋白。
影响胚胎培养体系的其他因素:
培养液的渗透压
培养液的温度
培养液的运输和保存