反复种植失败(RIF)是指40岁以下成年女性在3个新鲜或冷冻周期内移植至少3枚优质胚胎后仍未能实现临床妊娠,其中优质胚胎包括:第3天胚胎(细胞数≥8个、卵裂球大小均匀、碎片率<10%和囊胚≥3BB)。
RIF是一个具有挑战性的临床难题,是人类辅助生殖领域中亟待解决的重要问题之一。RIF影响全球约10%的体外受精‑胚胎移植(IVF-ET)患者,给不孕症夫妇带来了一定的经济和心理负担。尽管近年来IVF-ET技术飞速发展,但RIF仍是影响女性成功妊娠的重要问题,至今难以形成统一的诊疗标准。
RIF发生原因复杂,包括母体因素、男性因素和胚胎因素,其中母体因素又包括染色体异常、免疫异常、血栓前状态、子宫内膜容受性不良、感染、生殖系统解剖结构异常和内分泌稳态失衡等。
子宫内膜容受性(ER)是指其对囊胚定位、黏附、着床等变化的容受状态,该状态直接影响胚胎着床的成功率。既往常用检查ER的方法为超声检查,超声检查指标包括子宫内膜厚度、形态、子宫动脉血流情况等;同时结合子宫内膜厚度、雌激素指标联合评估。子宫内膜容受性检测(ERT)技术打破以往种植窗(WOI)恒定的想法,为生殖领域引入个体化WOI及个体化移植概念。
冻融胚胎移植(FET)既能避免患者胚胎浪费,降低治疗成本,还能提高累积临床妊娠率,已成为不少RIF患者的首选方案。而在胚胎移植时子宫内膜是否处于最佳容受期在很大程度上影响着FET的成功率。通常情况下,人体子宫内膜具备对胚胎的接受能力的时期只有以下几个时期:黄体生成素后第7天(LH+7)或P+5,或是月经周期的第20-24天。以往的研究认为WOI是固定的,但近年来越来越多的研究发现部分患者的WOI表现为提前、推后或缩短,以及患者存在个体差异性,影响妊娠成功率。
子宫内膜容受性检测(ERT)被认为是较为客观、准确的一种ER评估方法。研究显示,根据ERT检测结果指导个体化胚胎移植(pET)与常规FET组相比,着床率和妊娠率显著提高。但近期的一项荟萃分析发现,ERT组的活产率和继续妊娠率与非ERT组相比差异无统计学意义,ERT是否能提高IVF周期的妊娠率尚不明确。
ERT的检测需要进行侵入性的子宫内膜活检,机械性的损伤可能干扰与ER相关的基因表达,影响其准确性,而且检测周期不能进行胚胎移植,也可能影响检测结果与妊娠结局相关性的确定。
ERT不支持在接受第1次胚胎移植的患者群体中常规使用。ERT适用于RIF患者,该检查为有创性,费用较高。该项目目前临床运用尚不广泛,主要用于RIF或进行植入前胚胎遗传学诊断技术(PGT)的患者。
内膜制备方法:月经第3天,口服戊酸雌二醇片4-6mg/d,连用14d后再加用黄体酮注射液60mg/d,在注射黄体酮第6d接受内膜活检,根据ERT结果调整使用黄体酮的转化时长再行FET。无ERT组在加用黄体酮注射液第6d进行FET。
ERT样本采集、周期类型及送检流程
子宫内膜取样操作:
ERT方法:ERT组患者黄体酮转化第6天使用一次性子宫内膜样本采样器伸入宫腔抽吸约3-8mm大小的活检样本,立即将子宫内膜活检组织放入专用样本采集管,放入组织后,颠倒管子几次,确保组织没入保存液中,常温寄送;夏季高温寄送建议使用蓝冰。大约在10个自然日出具检测报告。
注意:若保存液中有沉淀,置于37°C溶解后使用。
根据检测结果判断受试者是处于子宫内膜容受期,还是处于容受前期或后期,以便调整移植时间,在容受期进行FET-ET。
RIF是一种多病因、异质性疾病。针对此类患者,临床医生需在详细病史采集的基础上、结合患者实际病情,选择有针对性的辅助检查进行RIF病因筛查,并依据相应医学指征进行治疗。子宫内膜容受性检查目前尚处于研究阶段,子宫内膜活检和ERT可用于辅助判断种植窗开放时间,但由于操作有创、不能提供实时结果,且不能在胚胎移植周期使用,故其实用性受限。ERA通过检测特异性的子宫内膜基因表达水平来预测胚胎种植窗是否开放,但其结果判定较为复杂,价格昂贵,预测窗口期准确性和对临床结局的改善效果不明确,因此,ERT尚未作为RIF患者的常规检查,ERT需要在临床实践中逐渐完善、降低成本,提高预测种植窗时间的准确性。